餐饮回收油检测方法包使用说明书
1        适用范围
适合大豆油、花生油、菜籽油、葵花籽油、调和油和色拉油中含餐饮回收油的测定方法。
2        原理
    食用植物油经高温加热和反复使用产生某些极性物质（如油脂本身的碎裂、产生的丙稀酰胺、多环芳烃、食品自身极性成分溶入等），对回收油进行一般提炼处理时可部分清除这些极性物质，但仍会有一部分极性物质的残留。用Cleanert EOS吸附型固相萃取小柱分离植物油中的主体成分甘油三脂，富集甘二脂以下的相对极性较弱的物质，用硅胶薄层层析板对富集物进行展开、显色，可观查到这些残留极性物质呈现“拖尾”现象，与未使用过的植物油有明显差异。
3  试剂及材料：
3.1  Cleanert EOS固相萃取柱 (P/N: EOS200012)；
Agela 专用硅胶TLC板 (P/N: T-CS2020-E)；
3.2    层析板展开剂：苯/乙酸乙酯/乙醚/冰乙酸=80/10/10/0.2（V/V）。
3.3  层析板显色溶液：10.0g磷钼酸，溶解于无水乙醇中定容至100 mL。
3.4   阴性对照样品：标准食用植物油阴性对照样品：未经加热处理过的食用植物油，例大豆、花生、葵花、菜籽油。使用前加入同样量的石油醚稀释一倍上样。
3.5   阳性对照样品：将食用植物油烧至发烟，保持30min后，凉至80℃并保持，按照5 % （W/V）的比例加入三硅酸镁或酸性活性白土，用玻棒搅动30min ，冷至室温。用中速定性滤纸过滤后作为阳性对照品。
4         试样制备
4.1  称取均匀的油样2 g（±0.0001g）于10mL具塞塑料试管中，加入2 mL石油醚涡旋混合。
4.2  固相萃取：将Cleanert EOS固相萃取小柱固定于12位固相萃取装置上，用4.0mL石油醚活化小柱，待石油醚自然流尽时，将稀释好的待测油样注入小柱中，待样液自然流尽时，用6.0mL石油醚洗净样品试管和萃取小柱柱壁，再用10.0mL石油醚重复洗涤一次。于层析柱下端换上一2mL具塞塑料试管，用2.0 mL丙酮洗脱氧化铝固相萃取小柱，收集流出液，混合均匀后用于薄层层析法的点板。同时将阴性对照样品和阳性对照样品按上法处理好备用。
4.3   薄层层析：取出硅胶层析板，用细铅笔在距离薄层层析板下端1.5 cm的位置画好点样线，在线上每相隔约1.5 cm处标上点样位置，注明样品标记。用平头微量进样器或薄层点样管在标记处点样2.0 μL处理好的点样溶液，使点样斑的直径不要大于3mm ，同时在每张板的相同点样水平线上点上阴性对照样品和阳性对照样品的处理溶液各2.0 μL。把层析板放入装有展开剂的展开槽中，先用展开剂蒸汽饱和15分钟后，再按倾斜上行法展开7cm ，从展开槽中取出薄层板，于通风环境中自然挥干溶剂10分钟后待显色。
4.4  将显色剂均匀喷雾层析板上，于通风环境中自然挥干溶剂，放入120℃的恒温干燥箱中烘5min使之显色，待出现蓝色清晰的圆形斑和线性条纹后，取出，冷至室温，观察结果。
4.5  判定
正常的植物油样品在薄层板上展开后的显色斑点呈不连续的圆形斑点，从上至下的斑点依次为甘油三脂、甘油二脂、单甘油脂、游离脂肪酸和磷脂，随不同的植物油脂种类不同其斑点的深浅、大小会略有不同，但展开板下方（极性区）没有明显的“拖尾”线，样品的点样处没有肉眼可见的点样斑存在。如果在展开板下方（极性区）有明显“拖尾”线，样品的点样处有清晰的点样斑点存在，即可判断样品中含有餐饮回收油。观察结果的同时参看阴性对照油和阳性对照油。阴性对照油和阳性对照油的薄层色谱图参考附录A。
 
附录 A  资料性附录
阴性对照油和阳性对照油的薄层色谱图

 
图A.1阴性对照油和阳性对照油的薄层色谱图